Respuesta metabólica (silimarina 35 ppm) sobre la calidad del huevo en ponedoras comerciales con síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS)
Conceptos prácticos para el control de las enfermedades metabólicas de las aves con flavonoides (Liver Free).
(SEGUNDA PARTE)
Solo hay dos formas de vivir la vida, Una es como si nada fuera un milagro; la otra es como si todo fuera un milagro.
Albert Einstein.
Resumen
En este estudio se evaluó la capacidad antioxidante de la silimarina -lecitinizada específicamente contenida en el producto Liver Free compuesto por una mezcla de (Extracto de Sylibum marianum 10g, lecitina de soya 30g (Silimarina lecitinizada), Extracto de Cynara scolymus 25g, DL-Metionina 5g, Excipientes C.S.P 100g), donde se evaluó la calidad de los huevos específicamente para las variables resistencia de cáscara (Nwt) y Unidades Haugh en un periodo de 60 días de consumo. Se establecieron tres grupos de aves manejadas en jaulas convencionales, un grupo control negativo (Sin Liver Free) y el grupo tratamiento con la adición de 350 g/ton de Liver Free (35 gr/ton de silimarina + 30 g de lecitina (Silimarina-lecitinizada)), y un grupo de referencia de la línea, con un diseño experimental de bloques completamente al azar, la dosis de silimarina consumo ave promedio día fue de 22.12 mg/k, con un reto metabólico de síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS). las aves de este estudio mostraron una media de resistencia de cascara de 44.26 Nwt (P=0.00427*) para el grupo del tratamiento que contiene silimarina-lecitinizada, al realizar la prueba comparativa entre los tres tratamientos por la prueba comparativa de Tukey el valor de P=0.0017** altamente significativo a favor del grupo tratamiento. Al analizar la Unidades Haugh del tratamiento vs el grupo control se arrojan los siguientes resultados de medias de 72.19 Vs 64.42 con un valor de P=0.01212* diferencia significativa a favor del tratamiento, y al realizar el anova para el tratamiento el valor de P=0.0011** altamente significativo, en general estos resultados demuestran que al usar Liver Free (Silimarina Lecitinizada) a 22.12 mg/k en ponedoras comerciales mejora el desempeño en aves positivas a FLHS con respecto a las variables de calidad de huevos, resistencia de cáscara y unidades haugh.
Palabras Claves: Sylibum marianum, Cynara scolymus, FLHS (Síndrome de hígado graso hemorrágico), Unidades Haugh.
Introducción
La Producción avícola colombiana en general y en particular el reglón de la producción de huevo ha presentado un crecimiento del 3.5%, con una población de aves encasetadas de 45.265.000 con un consumo per cápita en 2021 de 334 huevos / persona año [1]. Utilizando un modelo de proyección de correlación entre el crecimiento anual dado por la ecuación Y=470.7(X)+5226.4 con un R2=0.955 en el año 2030 la producción anual de huevos pasara de 17.000 millones de huevos año a 19.000 millones, con un consumo per cápita de 359 huevos /persona /año [1]. Dentro de los sistemas de producción de huevos la metodología de producción en jaula se ha impuesto en la 2 últimas décadas en la mayoría de los países, Mench & Rodenburg, (2018) [2], concluyeron que el 90% de los huevos producidos en el mundo eran bajo el sistema de producción en jaulas, Varios estudios han demostrado que algunas enfermedades están asociadas a el sistema de alojamiento, Julián, (2005) [3], Leeson (2007) [4], informó que algunos desórdenes metabólicos de las aves incluyendo El síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS-por sus siglas en inglés), está asociado con el sistema de encasetamiento.
El FLHS, es un trastorno metabólico (no infeccioso) que se presenta en las gallinas ponedoras, caracterizado por una acumulación excesiva de grasa en el hígado, y en la cavidad abdominal, donde se presenta ruptura de la cápsula hepática causando muerte súbita [5]. Las aves que presentan FLHS son muy difíciles de diferenciar de las aves sanas, igualmente se observa una disminución en la producción de huevos concomitante con una afectación en la calidad de los mismos, aumento en el peso promedio corporal de la parvada afectada y mortalidad [3, 4]. En las aves los lípidos y los triglicéridos son almacenados en los hepatocitos, adipocitos y ovocitos en crecimiento [6] El almacenamiento de los triglicéridos en estos órganos depende de la biodisponibilidad de un sustrato lipídico plasmático procedente de la dieta o de la lipogénesis del hígado, los lípidos hepáticos e intestinales se ensamblan como lipoproteínas, y el almacenamiento en los ovocitos está asociada a la vitalogénesis [7], La acumulación excesiva de grasa causa esteatosis hepática y síndrome de hígado graso hemorrágico [6]. Salazar, J .,(2021) [8], sugiere que la inhibición de la síntesis de DNA y RNA que causan los aductos (complejos químicos formados entre estos últimos y las micotoxinas) alteran la estructura de la membrana lipídica que pueden generar cambios en la lipolisis causando la lipoperoxidación hepática, por otro lado Shini et al.,(2019) [9] en un estudio de prevalencia en Australia demostró que la incidencia de FLHS en aves entre las 29 a 73 semanas de edad con manejo en jaulas estaba en un rango entre 17 a 46%.
La silimarina es un extracto purificado de la semilla del Sylibum marianum el cual contiene una mezcla de flavonoides como la silibina, isosilibina, silidianina y silicristina como ingredientes activos [10], La silimarina actúa como un potente bloqueador de la producción de radicales libres que inhibe la lipoperoxidación de las grasas y proteínas al mejorar la actividad de las enzimas antioxidantes endógenas y los antioxidantes no enzimáticos (Vitamina E y C) en el hígado y los tejidos musculares [11], Quarantelli et al., (2009) [12], reporto una mejora en la producción y en la calidad de los huevos al incluir silimarina en la dieta a una dosis de 200 mg/k, Por lo tanto la silimarina puede mejorar los valores de estrés oxidativo y a la vez mejorar la calidad de huevo frescos o almacenados en aves asociadas a problemas de hígado graso [13].
El objetivo de este trabajo de investigación es evaluar el producto Liver Free que contiene (Extracto de Sylibum marianum 10g), sobre la respuesta en la calidad de los huevos (Resistencia y Unidades Haugh).
Materiales y métodos
Liver free-Composición
Se uso el suplemento nutricional Liver Free, de características cristalinas, de color blanco con la siguiente composición (Extracto de Sylibum marianum 10g, lecitina de soya 30g (Silimarina lecitinizada), extracto de Cynara scolymus 25g, DL-Metionina 5g, Excipientes C.S.P 100g). La silimarina es utilizada como un coadyuvante en el tratamiento de las afecciones hepáticas (actividad hepatoprotectora), posee una actividad antioxidante e inmunomoduladora. La lecitina de soya contenida en este producto además de mejorar la absorción de la silimarina, es una mezcla de fosfolípidos que son claves en la síntesis de la membrana celular y es una fuente de cloruro de colina que tiene una actividad lipotrópica, favoreciendo la movilización de las grasas hepáticas que evitan la esteatosis, El extracto de Cynara scolymus tiene una acción como colerético y colagogo , hipolipemiante y hepatoprotector, la metionina es un aminoácido esencial que es un intermediario de la biosíntesis de cisteína, carnitina, taurina, fosfatidilcolina entre otros, que adicionalmente cumple una función como el precursor del glutatión (actúa como antioxidante endógeno).
Características de la granja
La prueba se realizó en una granja de ponedoras comerciales, Granja Avícola Alejandría, ubicada en el municipio de Jamundí (Valle del cauca), con una población de 200.000 mil ponedoras comerciales, con sistemas de producción mixto en piso y en jaulas, la temperatura promedio durante el ensayo fue de 29.3 G. centígrados, con agua de pozo.
La mezcla de Liver Free mejoro las dos variables evaluadas independientemente.
Aves
Se evaluaron las aves encasetadas en jaulas del galpón 6-1, 6-2 que contienen 24.000 aves de la raza Isa Brown de 96 semanas de edad, con un peso promedio de 2050 gramos y una uniformidad del 76%, a la necropsia presentaron sintomatología clínica de síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS) (Ver imagen No. 1), presentando una mortalidad semanal del 2.44%. En esta caseta se usó Liver free a una dosis de 350 g/ton de alimento por 60 días. El galpón 7-1, 7-2 que tiene una población de 20.000 aves Isa Brown de 86 semanas de edad fue usado como grupo control.
Huevos
Se recolectaron 180 huevos (90 grupo tratamiento -90 grupo control negativo) en un periodo de una semana posterior a los 60 días de consumo del Liver free, se enviaron a el laboratorio de control de calidad Sincro Service en diferentes tiempos de recolección (EGG QUALITY CONCEPT), donde se evaluaron las siguientes variables de calidad de huevo: espesor de la cáscara (milímetros), Resistencia de la cáscara a la fractura (Newtons), Unidades Haugh (UH)-mide la frescura del huevo.
Análisis Estadístico
El presente trabajo se realizó en tres fases, la primera se avalaron las medidas de tendencia central, medidas de variabilidad e inferencia estadística para medias poblacionales con un nivel de confianza del 95% con función entre Resistencia en Newton y Unidades Haugh, el segundo se realizó una Correlación de Person entre ambas variables, y el último fue un diseño experimental completamente aleatorio con pruebas comparativas de Tukey, usando el programa SAS versión 2020.
Resultados
Resistencia de la cáscara (Newtons)
Para el caso de resistencia de cáscara los valores del uso de Liver Free evaluados reportan un promedio de 44.26 Nwt, con una desviación estándar de 7.99, un CV% de 17.96% indicando una ligera heterogeneidad en los niveles de respuesta, y un valor de P= 0.00427 que ratifica una diferencia estadística significativa comparados con el control negativo; que arroja un promedio de 43.12 Nwt, y una desviación estándar de 6.15 y un CV% de 14.33% siendo más homogéneo en los niveles de respuesta con un valor de (P= 0.0012) que establece una diferencia significativa comparada con el valor que exige la línea, al realizar la prueba comparativa de Tukey entre los tratamientos, se observa un valor de P=0.017** que es altamente significativo para la variable resistencia a favor del tratamiento con Liver Free, al compararlo entre el grupo control negativo y el que pide la referencia de la línea.
Para el caso del tratamiento con Liver Free 350 g/ton, Las Unidades Haugh presentan un promedio de 72,1963, con una desviación estándar de 10.705 y un CV% de 14.891, indicando homogeneidad en los niveles de respuesta con P= 0.01212* demostrando una diferencia estadística significativa al compararlos con los valores del control negativo (no uso del Liver Free) que presenta un promedio de 64.4243, con una desviación estándar de 11.148 Unidades Haugh y un coeficiente de variación del 17.3051 indicando una ligera heterogeneidad entre los datos,
Unidades Haugh (UH)
Para el caso de resistencia de cáscara los valores del uso de Liver Free evaluados reportan un promedio de 44.26 Nwt, con una desviación estándar de 7.99, un CV% de 17.96% indicando una ligera heterogeneidad en los niveles de respuesta, y un valor de P= 0.00427 que ratifica una diferencia estadística significativa comparados con el control negativo; que arroja un promedio de 43.12 Nwt, y una desviación estándar de 6.15 y un CV% de 14.33% siendo más homogéneo en los niveles de respuesta con un valor de (P= 0.0012) que establece una diferencia significativa comparada con el valor que exige la línea, al realizar la prueba comparativa de Tukey entre los tratamientos, se observa un valor de P=0.017** que es altamente significativo para la variable resistencia a favor del tratamiento con Liver Free, al compararlo entre el grupo control negativo y el que pide la referencia de la línea.
Dado lo anterior se realizó el análisis de varianza para Unidades Haugh por la prueba comparativa entre los tratamiento por la prueba de Tukey donde se aprecia que hay efecto altamente significativo en los tratamientos donde al usar Liver Free arroja mayores unidades Haugh P=0.0011** diferencia altamente significativa, comparados con el grupo control y los datos de la referencia de la línea.
Por último, realizamos un análisis de correlación multivariante entre las variables resistencia vs unidades Haugh (UH), Por el cuadrado de Person, con el objetivo de determinar si al mejorar la calidad de la albúmina (Unidades Haugh) mejoraba consecuentemente la resistencia de la cáscara y utilizamos el análisis de bioestadística de la siguiente manera:
La Silimarina supera los parámetros de calidad de huevo que exigen las líneas comerciales de postura.
Índice de Correlación de Person (ICP):
El valor que arrojo la correlación de Person es de P=0.1152, es NO significativa, concluyendo que la formación de la albúmina y la clara no tiene nada que ver con la deposición del calcio para la formación de la cáscara y que son factores biológicos y fisiológicos que funcionan posiblemente como compartimentos individuales.
Conclusiones
Los análisis arrojan que la resistencia de la cáscara de los huevos (Nwt) es significativamente superior al usar Liver Free a una dosis de 350 g/ton por 60 días en aves que presentan sintomatología asociada al síndrome de hígado graso hemorrágico (FLHS), en aves de 96 semanas de edad.
La Silimarina mejora las Unidades Haugh porque mejora la absorción intracelular por el sinergismo con los fosfolípidos contenidos en la lecitina de soya.
Para la variable Unidades Haugh (UH), que mide la frescura de los huevos y la calidad de la albúmina, el tratamiento de 350 g/ton durante 60 días arrojo una diferencia altamente significativa a favor al comparar los tres tratamientos.
Al realizar un análisis de correlación multivariante entre las dos variables (Resistencia de la cascara vs Unidades Haugh), para determinar si una era causa de la otra, no se aprecia una correlación directa de causalidad entre las dos variables.
Discusión
Se condujo un trabajo de investigación para evaluar la capacidad antioxidante de la silimarina (Sylibum marianum),la capacidad colerético colagoga del extracto de alcachofa como barredor de grasas hepáticas, de la metionina y los fosfolípidos como coadyuvante en el proceso del metabolismo de las grasas, contenidos en el producto Liver Free (Marca comercial de Biotecno-Colombia), En aves comerciales de 96 semanas de edad positivas a FLHS donde se evaluó la calidad de los huevos de tres tratamientos en bloques completamente al azar con manejo en jaulas en el Departamento del Valle del Cauca, Colombia; y con una energía metabolizable de 2.950 Kcal, temperatura promedio por encima de los 29°C con disminución de la calidad del huevo específicamente por roturas, huevo con clara y yema muy líquidos. La característica de las aves con respecto a la edad en aves adultas con presentación clínica repetitiva de FLHS con mayor prevalencia en aves mayores de 80 semanas como lo demostró Weitzenburger et al., (2005) [14]. Por otro lado el cambio metabólico del síndrome de hígado graso, igualmente se altera la ovoposición al alterar el metabolismo hepático de las grasas deteriorando la calidad de los huevos e igualmente disminuyendo el porcentaje de producción como lo demostró Lesson, 2012 [15]; Julián 2005 [3]; Lesson 2007[4].
para controlar los desórdenes metabólicos, y las afecciones causadas en el hígado y consecuentemente la calidad de los huevos (Resistencia, Unidades Haugh) se usan mezclas de productos herbales los cuales contienen silimarina para disminuir el efecto toxico causado por la lipoperoxidación, como el reportado por Faryadi, S., et al (2021) [16], al usar 200 ppm de silimarina lecitinizada (Una mezcla de silimarina con lecitina de soya-para mejorar la absorción de la silimarina), las unidades Haugh en promedio fueron 83.5 comparadas con 72.19 en este trabajo, pero hay que tener en cuenta en estas aves su edad, 96 semanas de vida y el efecto crítico del síndrome de hígado graso hemorrágico es muy fuerte el cual afecta la conformación del huevo, de igual manera se reporta la producción de Malondialdehido (mg/g Yema de huevo), esta formación es explicada por Salazar, J .,(2021) [8], y Faryadi, S., et al (2021) [16] Al usar silimarina lecitinizada a 200 ppm reporta 0.275 (mg/g Yema de huevo) vs 0.312 para silimarina en polvo o 0.302 para nano silimarina; demostrando un efecto antioxidante sobre la yema de huevo cuando se usa una dosis de 200 mg/k (P=0.0126). El efecto de le dosis de silimarina en este trabajo fue de 22.12 mg/kg durante 60 días del experimento, arrojo una mejora en las unidades Haugh de 72,16 y un a resistencia de cascara de 44 Nwt comparado con un grupo control negativo (P<0.05), igualmente Quarantelli, et al., (2009) [12] reporto mejoras en la producción de huevos, en la calidad de huevos y en la conversión al dosificar silimarina a una dosis de 200mg/k. Hashemi Habar et al., (2018) [17] reporto que a una dosis de 30mg/k se incrementó la producción de huevos y disminuyo la conversión, Statsnik, et al., (2019)[18]
El efecto sobre la mejora en la calidad de huevos reportado en este trabajo de la silimarina lecitinizada es confirmado por Quarantelli, et al.,(2009) [12]; Faryadi, S., et al (2021) [16], donde se incrementa la masa de huevo que se va a ver reflejada en la unidades Haugh, los resultados sobre la calidad de huevo pueden ser explicados por que el complejo de silimarina-fosfolípidos (silimarina con lecitina de soya, contenida en el Liver Free) se hacen más biodisponibles comparada con un extracto de silimarina sola, como lo demuestra Faryadi, S., et al (2021) [16] logrando una mejora sustancial cuando cruza las membranas lipídicas celulares que finalmente mejoran la circulación sistémica de la silimarina [19-20]
Unidades Haugh (UH)
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